文摘
摘要目的:确定表型变异造成的频谱GRIN1编码NMDA受体亚基GluN1并调查他们潜在功能的病理生理学。
方法:我们收集了一些诊断的分子和临床数据,研究群体。功能的后果GRIN1研究了突变非洲爪蟾蜍光滑的卵母细胞。
结果:我们确定了杂合的新创GRIN114个人,回顾了突变表型的9之前报道的病人。这些23个人看到一个不同的表现型深刻的发育迟缓,严重智力障碍没有讲话,肌肉张力减退,运动过度的运动障碍,oculogyric危机、皮质盲,广义脑萎缩和癫痫。突变集群内跨膜段和造成损失的渠道功能不同程度的显性负效果。此外,我们描述2纯合子GRIN1错义突变(1,1)截断),每个隔离有严重神经发育表型在血缘家庭。
结论:新创GRIN1变异与严重的智力障碍与大脑皮层视觉障碍以及眼球运动的运动障碍被歧视表型特征。NMDA受体功能的损失似乎是潜在疾病机制。杂合的和纯合突变的识别模糊了边界的显性和隐性遗传GRIN1相关的疾病。
术语表
- 自闭症谱系障碍=
- 自闭症谱系障碍;
- ID=
- 智力障碍;
- NMDAR=
- 门冬氨酸受体;
- SNV=
- 单核苷酸变异;
- VPA=
- 丙戊酸钠
门冬氨酸受体(NMDARs)四聚物的钠离子通道ligand-gated渗透+K+,Ca2 +由甘氨酸绑定GluN1子单元和2谷氨酸绑定GluN2/3子单元(GluN2A、GluN2B GluN2C, GluN2D, GluN3A, GluN3B)。1,- - - - - -,3
相比GluN2/3子单元,每个人都有特定的时空表达模式在整个中枢神经系统,GluN1编码GRIN1是一个无处不在的组件的受体。4,5
突变的NMDAR子单元与各种不同的神经发育表型相关联,3包括智力残疾(ID),6,- - - - - -,8癫痫,9,- - - - - -,13和自闭症谱系障碍(ASD),和不同的精神疾病。14,15
虽然一些研究关注的表型GRIN2A- - -GRIN2B相关的疾病,对患者的临床表现GRIN1突变。我们回顾了临床患者的数据GRIN1从不同的研究群体以及突变诊断实验室。
此外,我们回顾了从之前报道患者临床和遗传信息GRIN1突变。九杂合的新创突变之前被报道与基本的表型信息:4人描述nonsyndromic和特异性的ID(精神发育迟滞,常染色体显性8,614254年人类),8,16,171个人Lennox-Gastaut类型的癫痫性脑病,9和4个人被描述严重发育迟缓和运动障碍有关。18
我们的研究旨在全面描述相关的表型和功能的调查的结果GRIN1突变。
方法
病人。
我们回顾了临床和遗传信息在病人谁GRIN1突变检测通过不同的新一代测序方法在诊断和研究环境包括目标面板测序19或whole-exome测序(表e 1、a和b半岛投注体育官网®网站半岛投注体育官网Neurology.org)。根据父母的样品的可用性,每个突变的新创状态是通过传统Sanger测序证实的。
标准协议的审批、登记和病人同意。
书面知情同意为每个个体基因测试得到。基因检测在医学伦理委员会批准的研究设置大学的安特卫普,比利时;西方的伦理委员会新西兰、丹麦;瑞士苏黎世的Kantonale Ethikkommission;和其他当地伦理委员会提供信息的中心。
在硅片的预测。
的预测功能的影响确定编码变异进行评估由不同的计算机分析程序(PolyPhen2,http://genetics.bwh.harvard.edu/pph2/MutationTaster,http://www.mutationtaster.org)使用GRIN1成绩单ENST00000371561数量(表依照)。变异是比60706年控制ExAC浏览器(http://exac.broadinstitute.org/)。保护突变位置使用不同物种的序列比对评估(图e 1)。NMDAR亚基的分子建模进行根据Endele et al。7
DNA结构,卵母细胞表达和电生理学。
为非洲爪蟾蜍光滑的卵母细胞实验,GluN1 GluN2B构造和封顶cRNAs生成的如前所述。11,12一些突变引入这些构造使用QuikChange定点诱变工具包(Stratagene;安捷伦科技,圣克拉拉,CA)和DNA测序证实了。卵母细胞是孤立的和维护如前所述。20.谷氨酸、甘氨酸和锌2 +剂量反应曲线的野生型GluN1 / GluN2B和突变NMDARs分析2-electrode电压钳记录所述。21量效曲线和电流跟踪数据所示用KaleidaGraph(协同软件、阅读、PA)。数据代表意味着±SE。统计学意义是评估使用学生2-tailed未配对t测试如果不是另有说明。使用的所有化学品得到从σ。
结果
我们确定了14以前未报告的杂合的患者GRIN1突变。13个人,新创的突变被确认,而在病人22父母样本不能用于分离分析。然而,鉴于特定突变患者22复发2其他病人(病人21和23)和缺席在大型控制数据,我们得出的结论是,突变致病,包括这个病人在我们的分析。除了这些小说14例,我们回顾了表型数据的所有9之前报告病例8,9,16,- - - - - -,18患者4日和现在更多的临床信息。8,9,16因此,我们能够共同审查23个患者的临床资料(表1)。除了新创患者GRIN1纯合突变,我们确定了2GRIN1突变隔离2无关的有严重的神经发育障碍的家庭(1.1 2和5.1 - 3)。在这两种情况下,家庭成员携带杂合的GRIN1变异是不受影响。
表型与杂合的新创GRIN1突变。
几乎所有病人携带的新创GRIN1突变了深刻的全球发展迟缓,通常已经明显在新生儿期,导致严重的智力障碍(21/22;95%)。(表格e 1, a和b)患者通常没有了行走能力,缺失或口头沟通能力极其有限。
肌肉紧张性的21个病人信息可以被检索,15例(71%)有严重的躯干的和初始附属物的张力减退。很多病人表现出皮质脊髓的症状,如反射亢进(6/21;29%)或痉挛状态(6/21;29%),符合痉挛性的四肢瘫痪的诊断。大多数病人显示舞蹈症的,矛盾的,或运动障碍的运动障碍(14/23;61%),包括眼球运动的异常,如oculogyric危机(5/23;22%)。非特异性刻板动作被发现7/21例(33%)。
很大比例的患者(16/23;70%)癫痫。癫痫的表型GRIN1突变携带者是发病年龄变量对(天生活1 - 11年),癫痫符号学(婴儿痉挛症、滋补和清音的癫痫,hypermotor癫痫,焦dyscognitive癫痫,发热性癫痫,广义癫痫,癫痫持续状态),和相关的脑电模式(hypsarrhythmia、焦、多灶和广义峰值和波)。除了癫痫表型的变化,结果与癫痫发作的控制变量:在至少5例(5/16;31%)therapy-resistant癫痫,2例成为控制发作或有长期的癫痫的自由在丙戊酸钠(VPA),而2额外的病人反应良好托吡酯的组合,levetiracetam, clobazam或氨己烯酸和氯硝西泮除了VPA。在其他大多数癫痫患者,临床数据不可用或癫痫发作没有报告为著名的表现型(表e - 3 a和b)。鉴于这种可变性,癫痫的表型GRIN1突变携带者通常不像特定形式的癫痫脑病,形成鲜明对比GRIN2A- - - - - -和一些GRIN2B相关的疾病。9,- - - - - -,13
至少8GRIN1患者被诊断出患有自闭症或ASD-like特性(8/23;35%),承认严重的ID在大多数病人做了一个单独的ASD诊断挑战。这与先前的报道是一致的GRIN2B相关的疾病14:4个人面对侵略和有自伤行为或干扰疼痛知觉(4/23;17%)。8例(8/23;35%)nonspecified睡眠障碍。一些患者进食困难(9/23;39%),可能由于他们的基础张力减退和痉挛状态,需要在一些患者胃管喂食。一些病人出现皮质视觉障碍或延迟视觉成熟(5/23;22%)。
MRI研究结果可供审查在19个病人,和非特异性的体积损失或萎缩在11/19(58%)的病人。这些核磁共振的发现被认为是不足以解释四肢瘫痪的存在或运动障碍的患者。皮质萎缩明显已经在年轻的年龄(如例18和20个月25在3岁)没有显著年龄相关性进展的证据。
两名患者(2/21;10%)有一个marfanoid体质,而几个身材正常生长迟缓或低体重。头小畸型在6/23(26%)的病人。变形特性,如果存在,是微妙的。深陷的眼睛,之前报道的共同特征,18不可能一直出现在我们的病人。
而21/22的病人有严重的ID,一个之前报道病人携带GRIN1p。Glu662Lys mutation presented with a less severe phenotype.8病人14岁时可以独立行走18个月和演讲推迟了足够的第一句话在9个月只在5岁和2-word短语。此外,病人没有出现任何其他并存状况包括癫痫、运动障碍,肌张力异常或愿景。
GRIN1与隐性遗传突变。
与ID和ASD,血缘家族一个纯合子GRIN1p。一个rg217Trp missense variant was found in 2 affected brothers. Both parents were healthy heterozygous carriers. The variant was predicted to be pathogenic (table e-2) and was absent in ExAC controls.
在第二个血缘家庭,我们发现了一个纯合子的p。Gln556* truncation mutation in 3 siblings with severe neonatal epileptic encephalopathy. All 3 siblings died between 5 days of life and 5 months secondary to intractable seizures. Both parents were unaffected heterozygous carriers of the p.Gln556* mutation.
在110 ExAC-annotated错义和8个删除GRIN1变异,据报道,在60706年纯合子控制样本。
光谱和集群的GRIN1突变。
所有16个不同的新创突变23小说和发表的病例中标识错义变化和集群内或接近跨膜域形成的内在受体离子通道孔(图1)。有趣的是,这一地区被广泛免于在控制和显示了一个高水平的遗传变异在不同的物种保护(图e 1)。相比之下,有广泛的报道浓缩单核苷酸变异(SNV)控制的n端结构域以及糖基GRIN1。新创突变域没有被观察到。报道突变不允许我们评估S1和S2配体结合位点的遗传变异性。然而,S1域包含大量和频繁SNV但没有致病突变到目前为止,而S2显示更少的变化只有2不再发生的SNV但突变(图1)。此外,这一突变检测在S2与最温和的表现型(病人14)相比,所有其他GRIN1新创突变与跨膜域密切相关。循环五个新创突变已发现独立的病人在我们组(p。Asp552Glu, p。Gly815Arg, p。Phe817Leu, p。Gly827Arg, p.Arg844Cys).
细胞外信号肽(SP), n端结构域,和配体结合位点(S1, S2)、跨膜域(M1-4),以及细胞内c端近端Ca域(CTD)2 +钙调蛋白结合域(CBD)。新创突变(红色)集群内或在非常靠近M1-4。此外,这个地区尤其免于产生遗传变异根据ExAC浏览器(罕见/单变体,灰色;重复/变异频繁,黑色)。2纯合子GRIN1变体用蓝色标记。
唯一的突变是跨膜外的集群是p。Arg217Trpmissense variant that was identified in a recessive family with unaffected heterozygous carriers.
功能的调查。
GluN1突变体与野生型的异位表达GluN2B子单元显示突变体没有响应的4到10毫米谷氨酸和甘氨酸,并因此被评为非功能性(p。Gln556 *, p。Gly618Arg, p.Gly620Arg, p.Gly827Arg; n = 10, each). For all other mutants, changes in maximal inducible currents and agonist affinities were examined. Four mutations (p.Pro557Arg, p.Tyr647Ser, p.Gly815Arg, p.Phe817Leu) resulted in a highly significant reduction of agonist Imax values (p< 0.001,n = 5 - 9;图e-2a)。我们的模型的GRIN1 / GRIN2BNMDAR11预测强劲intersubunit和intrasubunit相邻螺旋结构之间的相互作用M3, M4突变位置p。Pro557, p。Tyr647, p。Gly815, p。Phe817, and p.Gly827, thereby destabilizing the quaternary structure of the receptor transmembrane domains and disturbing assembly of NMDARs. Consistent with an impaired function ofGRIN1新创突变,突变p受体激动剂剂量反应曲线的分析。Gly815Arg和p。Phe817Leu additionally revealed a highly significant reduction in the affinities for both glutamate and glycine (figure e-2b). For positions p.Gly618 and p.Gly620, our model predicts a location in the membrane re-entrant loop (the P-loop) of the GluN1 subunit, which determines the narrow constriction and ion selectivity of the channel. Thus, conversion of the pore residues p.Gly618 and p.Gly620 to a charged arginine side chain likely has strong impact on NMDA channel properties. Coexpression of wild-type GluN1 with mutants GluN1 p.Tyr647Ser or p.Phe817Leu resulted in intermediate effects of agonist Imax values (p< 0.01,n = 5),支持的想法产生负面影响的替换的功能hetero-oligomeric NMDARs(图e-2c)。突变p。Arg217Trp,p。一个la645Ser, and p.Arg844Cys generated functional receptors with agonist Imax values (p> 0.05,n = 5)类似于野生型(数据未显示)。功能分析的错义变更GluN1 p。Arg217Trp氨基锌2 +绑定域名与野生型GluN2A子单元有显著提高锌2 +抑制(图e-2d),表明激活体内受损由于紧张性抑制增长GRIN1Arg217Trp- - - - - -GRIN2A受体在生理浓度的锌2 +。然而,功能分析突变p。Ala645Ser和p。一个rg844Cys revealed no significant effects on agonist Imax values or affinity, suggesting that these 2 substitutions may alter NMDAR function through other mechanisms. For example, since the recurrent substitution p.Arg844Cys is located in the intracellular Ca2 +-calmodulin-binding域,干扰与胞内蛋白的相互作用可能损害受体功能。我们分析新创突变是一致的显性负影响导致受体功能的重大损失。
讨论
我们回顾了14个小说和9之前发表个人携带杂合的GRIN1新创突变与神经发育表型有关。
深刻的发育迟缓与严重的ID和缺乏语言发展的主要特性,和肌肉张力减退导致四肢痉挛性脑瘫,运动过度的运动障碍包括肌张力障碍和舞蹈病,眼球运动的异常以及皮质视觉缺陷似乎是复发患者中发现GRIN1脑病。虽然这些特性中可以看到其他遗传癫痫脑病等SCN2A和SCN8A脑病(人类613721年,600702年),这些发现小说NDMAR脑病的上下文中。癫痫在大约三分之二的情况下发生。然而,没有明显的癫痫模式对发病年龄、发作符号学、脑电图特点,或结果。此外,癫痫的频率GRIN1患者可能高估由于包含高比例的癫痫患者的筛查人群。
GRIN1编码GluN1和自身抗体主要针对一种抗原决定基的n端结构域内GluN1导致越来越认可NMDAR脑炎的临床实体。22,23NMDAR脑炎是一种急性多种或parainfectious神经障碍的衰变NMDARs被认为是潜在的pathomechanism,部分并联GluN1损失函数的病理生理学中看到我们的患者GRIN1脑病。而敏锐的临床表现是截然不同的,与NMDAR脑炎呈现急性获得的条件GRIN1脑病是一种慢性神经发育疾病,我们想强调一个共享组症状包括舞蹈症的和矛盾的运动、癫痫、睡眠周期失调,我们看到在我们的病人队列。进一步研究是否能够解决问题GRIN1脑病表型足够具体假设NMDAR障碍在人类疾病的光谱。
GRIN1新创突变集群内或直接接近的跨膜域GRIN1(图1)。这些地区主要是免于遗传变异,凸显了这些领域的重要性。这个集群外唯一突变p。Arg217Trp,which appears to be only pathogenic when present homozygously and thus might mediate its effect through different effects compared to the heterozygous variants near the transmembrane domains.
所有报告新创是错义突变变体。相比GRIN2A和GRIN2B,杂合的截断GRIN1显然不会导致神经表型。此外,删除包含GRIN1以及删除或剪切位点变异被认为控制数据库,表明haploinsufficiencyGRIN1虽然罕见,容忍人类人口。
除了16个不同的杂合的新创突变,我们描述2隐性GRIN1突变。纯合子的功能丧失的p。Arg217Trpmutation segregated with severe ID, ASD, and movement disorders in 2 affected siblings in a consanguineous family (family 1), and a homozygous p.Gln556* truncation mutation was found in 3 individuals with fatal epileptic encephalopathy in family 5 (表1)。
随着NMDAR仅包含2 GluN1子单元,截断或缺乏GRIN1等位基因会导致NMDAR淘汰赛和完整的剥夺。几乎连续发作suppression-burst脑电图和早逝的3影响到家庭兄弟姐妹5 NMDAR GluN1的功能凸显了至关重要的作用。
这种疾病机制以及功能数据指向一个显性负效果。相比之下经常的增益函数在其他发现露齿而笑相关的神经发育障碍,11,12GRIN1新创突变p。Pro557Arg, p。Ser560dup, p。Gly618Arg, p。Gly620Arg, p。Tyr647Ser, p。Gly815Arg, p。Phe817Leu, and p.Gly827Arg result in a loss of function.
的程度和性质的损失由于新创NMDAR函数GRIN1突变对应只有轻微均匀严重的表型。一个可能的解释为缺乏genotype-phenotype相关可能影响亚基组成或贩卖NMDAR可能导致二次补偿机制共享GluN1各自的独立个人的严重缺陷GRIN1突变最终逃离可视化使用标准人工体外模型。
的多个观测杂合的新创GRIN1丧失突变,GRIN1相关疾病的复发原因严重和复杂的神经发育障碍。此外,纯合子GRIN1隔离与严重的表型突变表型重叠显示个人携带杂合的GRIN1新创突变。这个观察模糊的边界常染色体显性遗传、常染色体隐形遗传。星座严重ID和相关研究成果,其中包括著名的张力减退,运动失调,oculogyric危机,皮质视觉损伤或失明,没有讲话,行为问题,睡眠障碍,癫痫发作可能允许从其他常见形式的表型分化严重的ID。一起灾难性的表型在纯合子截断突变携带者,我们的研究结果强调NMDAR子单元的神经发育的重要作用。
作者的从属关系
人类遗传学研究所的(J.R.L.,H.O.H.,J。H。) and Integrated Research and Treatment Center (IFB) Adiposity Diseases (H.O.H.), University of Leipzig Hospitals and Clinics; Department of Neurophysiology and Neurosensory Systems (K.G., H.S., B.L.), Technical University Darmstadt, Germany; Division of Clinical Genomics (K.L.H.), Ambry Genetics, Aliso Viejo, CA; Division of Human Genetics (C.C.), University Children's Hospital, Inselspital, Bern, Switzerland; Folkhälsan Institute of Genetics (C.C.), Helsinki, Finland; INSERM (C.D., C.N., S.W.), U 1127, Sorbonne Universités, UPMC Université Paris 06, CNRS, UMR 7225, Institut du Cerveau et de la Moelle Épinière (ICM); Département de Génétique (C.D., C.N., D.H.) and Centre de Reference Épilepsies Rares, Epilepsy Unit (S.W.), AP-HP, Hôpital de la Pitié-Salpêtrière, Paris, France; Danish Epilepsy Centre (R.S.M., H.H.), Dianalund; Institute for Regional Health Services (R.S.M., H.H.), University of Southern Denmark, Odense; Cologne Center for Genomics (CCG) (D.L., P.N., H.T.) and Center for Molecular Medicine Cologne (CMMC) (P.N.), University of Cologne, Germany; Psychiatric and Neurodevelopmental Genetics Unit (D.L.), Massachusetts General Hospital and Harvard Medical School, Boston; Program in Medical and Population Genetics (D.L.) and Stanley Center for Psychiatric Research (D.L.), Broad Institute of MIT and Harvard, Cambridge, MA; Department of Neuropediatrics (B.A.N.), University Medical Center Giessen and Marburg, Giessen; Department of Neuropediatrics (G.K.), University Medical Center Münster, Germany; Division of Medical Genetics, Department of Pediatrics, University of Pittsburgh School of Medicine (G.L.A.), and Division of Child Neurology (A.G., D.S.R.), Children's Hospital of Pittsburgh, PA; Department of Medical Genetics (V.B.), Children's Hospitals and Clinics of Minnesota, Minneapolis; Institute of Clinical Genetics (D.B.), Klinikum Stuttgart, Germany; Department of Medical Genetics (C.R.J.P., D.M., E.F.) and Department of Clinical Neurosciences for Children, Women and Children's Division (P.S.), Oslo University Hospital and University of Oslo, Norway; Division of Neurology (D.L.D., I.H.), The Children's Hospital of Philadelphia, PA; Section of Clinical Genetics (E.S.D.), Carilion Clinic Children's Hospital, Roanoke, VA; Department of Clinical Genetics (E.K.B., C.A.R., M.J.V.H.), Leiden University Medical Center, the Netherlands; The Center for Rare Childhood Disorders (V.N., K.R., N.B., I.S., R.R.), Translational Genomics Research Institute (TGen), Phoenix, AZ; Department of Medical Genetics (B.P.C.K., C.G.F.d.K.), UMCU, Utrecht, the Netherlands; Centro Hospitalar do Algarve (J.S., C.M.), Faro, Portugal; Neurogenetics Group, VIB-Department of Molecular Genetics (S.W., K.H., P.D.J.), and Laboratory of Neurogenetics, Institute Born-Bunge (S.W., K.H., P.D.J.), University of Antwerp; Division of Neurology (P.D.J. and S.W.), Antwerp University Hospital, Belgium; Department of Paediatric Neurology (L.D.M.), University Hospital, Vrije Universiteit Brussel, Bruxelles, Belgium; Aix Marseille Université (M.M.), INSERM, GMGF UMR_S 910; APHM, Departement de Genetique Medicale (C.B.), and Département de Génétique Médicale (T.B.), Hopital d'Enfants de la Timone, Marseille; Génétique Clinique (M.L.), Chromosomique et Moléculaire, CHU Hôpital Nord, St Pirest en Jarez; Service de Génétique Médicale (C.F.), Centre Hospitalier Universitaire de Clermont-Ferrand; Département de Médicine Translationnelle et Neurogénétique (A.P.), IGBMC, CNRS UMR 7104/INSERM U964/Université de Strasbourg, Illkirch; Laboratoire de Diagnostic Génétique (A.P.), Hôpitaux Universitaires de Strasbourg, France; CeGaT GmbH (E.R., S.B.), Tübingen, Germany; Swiss Epilepsy Center (E.R., H.V., T.D.), Zurich, Switzerland; Department of Neuropediatrics (I.H.), University Medical Center Schleswig-Holstein, Kiel Campus, Germany; Centre de Recherche du Centre Hospitalier Universitaire Sainte-Justine and Departments of Pediatrics and Neurosciences (J.L.M.), Université de Montréal, Canada; and the Department of General Paediatrics (S.S.), Division of Child Neurology and Inherited Metabolic Diseases, Centre for Paediatrics and Adolescent Medicine, University Hospital Heidelberg, Germany.
作者的贡献
研究概念和设计:约翰内斯·r·Lemke博多Laube Steffen Syrbe。收购数据:约翰内斯·r·Lemke克里斯汀•Geider,凯瑟琳·l·Helbig汉娜•舒兹,卡罗莱纳的勇气,Christel Depienne,卡罗琳•纳瓦戴尔芬苍鹭,Rikke s Møller赫勒Hjalgrim,丹尼斯·拉尔贝恩德•纽鲍尔,彼得•纽伦堡Holger蒂埃尔,格哈德•Kurlemann, Georgianne l·阿诺德Vikas Bhambhani Deborah巴尔托迪Christeen Ramane j . Pedurupillay Doriana Misceo,“Frengen, Petter Strømme Dennis j . Dlugos艾米丽·s·多尔蒂,伊米莉亚k . Bijlsma克劳迪娅·a·Ruivenkamp Mariette J.V.霍夫尔,艾米•戈尔茨坦Deepa s . Rajan Vinodh时称,克里•拉姆齐Newell Belnap,伊莎贝尔Schrauwen, Ryan Richholt鲍比pc Koeleman,乔奎姆Sa卡拉Mendonca, Carolien g . de Kovel莎拉•Weckhuysen凯蒂手下Peter de Jonghe琳达de Meirleir马修Milh,凯瑟琳•巴登海洋Lebrun,蒂芙尼Busa,克里斯汀•Francannet天使爱美丽峻峭,Erik Riesch Saskia Biskup,海因里希·沃格特,雅克·l·米肖德托马斯•多恩。分析和解释:约翰内斯·r·Lemke克里斯汀•Geider,凯瑟琳·l·Helbig Henrike o . Heyne茱莉亚Hentschel,汉娜Schutz Erik Riesch Saskia Biskup, Ingo Helbig,博多Laube Steffen Syrbe。写的手稿:约翰内斯·r·Lemke凯瑟琳·l·Helbig Ingo Helbig,博多Laube Steffen Syrbe。关键的知识输入的修订手稿:所有作者。研究监督:约翰内斯·r·Lemke博多Laube Steffen Syrbe。
研究资金
约翰内斯·r·Lemke (32 ep30_136042/1)和彼得•德•Jonghe (G.A.136.11。N和FWO/ESF-ECRP) received financial support within the EuroEPINOMICS-RES network (www.euroepinomics.org欧洲科学基金会)在Eurocores框架(养)。Saskia Biskup和Henrike Heyne获得金融支持从德国联邦教育与研究(BMBF IonNeurONet: 01 GM1105A FKZ: 01 eo1501)。凯蒂手下是一个科学和技术研究所的博士研究员(IWT)弗兰德斯。Ingo Helbig是基尔大学的校内基金的支持下,由德国研究基金会的资助(HE5415/3-1) EuroEPINOMICS框架内的欧洲科学基金会和其他德国研究基金会的资助(脱硫、HE5415/5-1他5415/6-1),德国教育与研究(01 dh12033, 3月10/012),和格兰特的德国章国际抗癫痫联盟(DGfE)。该项目还获得基础设施支持通过基尔的临床分子生物学研究所,支持卓越的DFG集群“炎症在接口”和“未来的海洋。”支持的项目也是popgen 2.0网络(P2N)通过德国外交部的资助教育和研究(01 ey1103)和由国际协调行动(ICA)授予G0E8614N。Christel Depienne、卡洛琳纳瓦和戴尔芬鹭收到金融支持外显子组分析的中心国家德Genotypage (CNG,埃夫里市,法国)。
信息披露
j . Lemke和k . Geider报告没有披露相关的手稿。k . Helbig受雇于并从橱柜遗传学收到工资。h . Heyne h·舒兹,j . Hentschel c .勇气,c . Depienne c·纳瓦d .鹭r . Møller h . Hjalgrim d·拉尔纽鲍尔,p .纽伦堡h·蒂埃尔g . Kurlemann g . Arnold诉Bhambhani d·巴尔托迪c . Pedurupillay d . Misceo e . Frengen p . Strømme d . Dlugos e·多尔蒂e . Bijlsma c . Ruivenkamp m .霍夫尔戈尔茨坦,d . Rajan诉时称,k .拉姆齐n . Belnap Schrauwen, r . Richholt b . Koeleman j . Sa c . Mendonca de Kovel c, s . Weckhuysen报告没有披露相关的手稿。k .们自2015年10月中旬以来,受到就业UCB制药(Braine-l 'Alleud,比利时)。该公司没有参与这项研究。p . De Jonghe l . De Meirleir m . Milh c·巴登m . Lebrun t . Busa c . Francannet, a .峻峭的报告没有披露相关的手稿。大肠Riesch受雇于并从CeGaT GmbH收到工资。外显子组测序在商用测试机构美国Biskup受雇于和从CeGaT GmbH接收工资。外显子组测序是商用测试的机构之一。h·沃格特t·多恩Helbig, j . Michaud b . Laube, s . Syrbe报告没有披露相关的手稿。 Go to半岛投注体育官网Neurology.org为充分披露。
承认
作者感谢病人和家庭成员的参与这项研究。
脚注
↵*这些作者的贡献同样co-last作家这个工作。
最后列出了作者的从属关系的文章。
去半岛投注体育官网Neurology.org为充分披露。资金信息和披露认为作者相关的,如果有的话,年底提供这篇文章。本文由作者支付加工费。
- 收到了2015年9月23日。
- 接受的最终形式2016年3月1日。
- ©2016美国神经病学学会的半岛投注体育官网
这是一个开放的分布式根据文章Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives许可证4.0 (CC BY-NC-ND),它允许下载和共享工作提供适当的引用。工作不能以任何方式改变或商业使用。
